Electrochemical genosensor for the direct detection of tailed PCR amplicons incorporating ferrocene labelled dATP
Visualitza/Obre
Autor/a
Magriñá, Ivan
Toldrà, Anna
Ortiz, Mayreli
Simonova, Anna
Katakis, Ioanis
Hocek, Michal
O'Sullivan, Ciara K.
Data de publicació
2019-03-30ISSN
0956-5663
Resum
An electrochemical genosensor for the detection and quantification of Karlodinium armiger is presented. The genosensor exploits tailed primers and ferrocene labelled dATP analogue to produce PCR products that can be directly hybridised on a gold electrode array and quantitatively measured using square wave voltammetry. Tailed primers consist of a sequence specific for the target, followed by a carbon spacer and a sequence specifically designed not to bind to genomic DNA, resulting in a duplex flanked by single stranded binding primers. The incorporation of the 7-(ferrocenylethynyl)-7-deaza-2′-deoxyadenosine triphosphate was optimised in terms of a compromise between maximum PCR efficiency and the limit of detection and sensitivity attainable using electrochemical detection via hybridisation of the tailed, ferrocene labelled PCR product. A limit of detection of 277aM with a linear range from 315aM to 10 fM starting DNA concentration and a sensitivity of 122 nA decade−1 was achieved. The system was successfully applied to the detection of genomic DNA in real seawater samples.
Tipus de document
Article
Versió del document
Versió acceptada
Llengua
Anglès
Matèries (CDU)
63 - Agricultura. Silvicultura. Zootècnia. Caça. Pesca
Pàgines
21
Publicat per
Elsevier
Publicat a
Biosensors and Bioelectronics
Citació
Magriñá, Ivan, Anna Toldrà, Mònica Campàs, Mayreli Ortiz, Anna Simonova, Ioanis Katakis, Michal Hocek, and Ciara K. O'Sullivan. 2019. "Electrochemical Genosensor For The Direct Detection Of Tailed PCR Amplicons Incorporating Ferrocene Labelled Datp". Biosensors And Bioelectronics 134: 76-82. Elsevier BV. doi:10.1016/j.bios.2019.03.060.
Número de l'acord de la subvenció
MINECO/Programa Estatal de I+D+I orientada a los retos de la sociedad/BIO2014-56024-C2-2-R/ES/MICROSISTEMAS PARA LA DETECCION RAPIDA, FIABLE Y RENTABLE DE MICROALGAS TOXICAS IN SITU Y A TIEMPO REAL/SEASENSING
MINECO/Programa Estatal de I+D+I orientada a los retos de la sociedad/BIO2017-87946-C2-2-R/ES/DISPOSITIVOS BIOANALITICOS PARA LA DETECCION RAPIDA Y RENTABLE DE GAMBIERDISCUS Y CIGUATOXINAS/CIGUASENSING
Programa
Aigües Marines i Continentals
Aquest element apareix en la col·lecció o col·leccions següent(s)
- ARTICLES CIENTÍFICS [2549]
Els següents fitxers sobre la llicència estan associats a aquest element:
Excepte que s'indiqui una altra cosa, la llicència de l'ítem es descriu com http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/